Чувствительность комплекта Реалбест ВГВ ПЦР 2: 20 МЕ/мл

Чувствительность комплекта Реалбест ВГВ ПЦР 2 составляет 20 МЕ/мл, что позволяет эффективно обнаруживать вирусные инфекции на ранних стадиях. Эта высокая степень чувствительности делает тест надежным инструментом для диагностики и мониторинга состояния пациентов.

Использование такого набора в клинической практике способствует раннему выявлению инфекции и постановке диагноза, что может значительно улучшить исходы лечения. Качество и надежность результатов теста играют ключевую роль в управлении заболеваниями, связанными с вирусом гепатита В.

• Код: 09.11.0002

Вирусный гепатит В представляет собой инфекционное заболевание печени, вызванное вирусом гепатита В, содержащим ДНК (ВГВ). Инфекция может исходить от заболевшего или бессимптомного носителя вируса. ВГВ передаётся через кровь и иные биологические жидкости.

Заразиться можно при незащищенном половом контакте, использовании нестерильных шприцев, переливании крови и пересадке донорских органов, ребенка может заразить мать, во время или после родов (через трещины в сосках при кормлении). В группу риска входят: медицинские работники, у которых возможен контакт с кровью пациента, пациенты, получающие гемодиализ, инъекционные наркоманы, люди, ведущие беспорядочную половую жизнь, дети, рожденные от матерей с ВГВ.

Точное число инфицированных остаётся неизвестным, поскольку у многих заражённых болезнь протекает без характерных симптомов, и такие пациенты не обращаются за медицинской помощью. Часто вирус удаётся обнаружить только при профилактических лабораторных тестах.

Для подтверждения инфекции и определения стадии заболевания применяются анализы на наличие антигенов вируса, антител к ним и ДНК вируса (метод полимеразной цепной реакции, обладающий высокой чувствительностью и специфичностью). С помощью ПЦР возможно качественное и количественное определение ДНК вируса. Измерение вирусной нагрузки позволяет оценить тяжесть заболевания, эффективность терапии и возможное развитие резистентности к противовирусным препаратам. Результат количественного определения обязательно содержит информацию об уровне выявленных фрагментов ДНК. Например, ДНК ВГВ – 5,6 х 10^4 (копий в пробе). Если фрагменты ДНК вируса гепатита В в пробе не найдены, будет выдано: ДНК ВГВ – не обнаружена.

Биоматериал, используемый для исследования: венозная кровь. Особенной подготовки не требуется. Перед сдачей крови на исследование не курить в течение 30 минут.

1. Подтверждение хронической формы вирусного гепатита В. 2. Прогнозирование динамики вирусного гепатита В. 3. Оценка результатов противовирусной терапии и определение дальнейших шагов лечения.

«Вирус гепатита В — кач.»

Для анализа специальная подготовка не требуется.

Определение ДНК вируса гепатита В (Hepatitis B virus) в сыворотке крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».

Аналитические показатели

• Исследуемый фрагмент – специфическая часть ДНК вируса гепатита В;
• Специфичность метода – 100%;
• Чувствительность метода – 20 МЕ/мл.

Подготовка

Не требуется проведением специальной подготовки перед анализом.

Показания

• Профилактические скрининговые исследования (ДНК вируса гепатита В – самый ранний показатель острого инфекционного процесса).
• Исследования при HBsAg-негативной инфекции.
• Обследование лиц, контактировавших с инфицированным.
• Диагностика смешанных гепатитов – выявление доминирующего вируса.
• Определение стадии активного размножения вируса при хроническом заболевании.
• Мониторинг эффективности лечения.
• Цирроз печени.
• Симптомы: усталость, общее недомогание, быстрая утомляемость, потеря аппетита, тошнота, дискомфорт в правом подреберье, увеличение печени, мышечные и суставные боли.
• Желтуха, зуд кожи, увеличение селезёнки, сосудистые «звёздочки», иногда покраснение ладоней и стоп.

Интерпретация результатов

Результат качественного теста выдаётся в терминах «обнаружено» или «не обнаружено».

• «обнаружено»: в образце обнаружен ДНК-фрагмент, специфичный для вируса гепатита В, что указывает на инфицирование;
• «не обнаружено»: в образце не найдены фрагменты ДНК вируса гепатита В или уровень возбудителя менее низкой чувствительности теста.

При количественном анализе количество ДНК вируса гепатита В выражается в МЕ/мл. Для перевода в копии/мл необходимо использовать соотношение 1 МЕ=4,5 копии ДНК вируса гепатита В.

• «не обнаружено»: ДНК вируса гепатита В не найдена или её содержание ниже предела чувствительности метода (50 МЕ/мл). Результат интерпретируется как «ДНК вируса гепатита В не обнаружена»;
• < 150 МЕ/мл: положительный результат с концентрацией ДНК вируса гепатита В менее 150 МЕ/мл;
• от 150 до 10^8 МЕ/мл: положительный результат. Полученное значение находится в пределах линейного диапазона;
• > 10^8 МЕ/мл: положительный результат с концентрацией ДНК вируса гепатита В более 10^8 МЕ/мл.

Интерпретация результатов исследования содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

HBV, ДНК количественно [реал-тайм ПЦР]

Данная процедура предполагает поиск возбудителя гепатита B (HBV) с использованием метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР), который определяет наличие вирусной ДНК и её количественную оценку в образце крови.

ДНК HBV может быть обнаружена в концентрации, находящейся за нижней границей линейного диапазона концентраций. Линейный диапазон концентраций – это диапазон, в котором можно точно посчитать количество копий возбудителя. Для данного анализа линейный диапазон концентраций ДНК HBV, определяемых детектирующим амплификатором, составляет 7,5×10 2 – 1,0×10 8 копий/мл образца.

Синонимы на русском

Вирус гепатита В (ВГВ), количественное определение ДНК.

Синонимы на английском

Hepatitis B Virus DNA, Quantitative, Real-Time PCR, Blood; HBV Viral Load; Hepatitis B Virus DNA Quant.

Метод проведенного исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Единицы измерения

Копия/мл (копия на миллилитр).

Какой биологический материал подходит для анализа?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить минимум за 30 минут до сдачи крови.

Общая информация об исследовании

Вирусный гепатит В (ВГВ) – это инфекционная болезнь печени, вызванная вирусом гепатита В (HBV), содержащим ДНК. В мире вирус гепатита В является одной из основных причин острого и хронического гепатита.

Действительное количество инфицированных неизвестно, так как у многих людей инфекция протекает без специфических симптомов и за медицинской помощью они не обращаются. Нередко вирус обнаруживают при проведении профилактических лабораторных исследований. По приблизительным подсчетам, в мире около 350 миллионов человек поражено вирусом гепатита В и ежегодно от его последствий умирает 620 тысяч. В России количество носителей HBV превышает 5 миллионов человек.

Источником инфекции может быть как заболевший, так и бессимптомный носитель. ВГВ распространяется через кровь и другие биологические жидкости. Риск заражения существует при незащищённом половом контакте, использовании нестерильных шприцев, переливании крови и пересадке органов. Младенец может заразиться от матери во время или после родов (через трещины сосков). В группу риска входят медицинские работники, пациенты на гемодиализе, наркоманы, люди с беспорядочной половой жизнью и дети, рожденные от матерей с ВГВ.

Инкубационный период заболевания – от 4 недель до 6 месяцев. Вирусный гепатит В может протекать как в виде легких форм, длящихся несколько недель, так и в виде многолетней хронической инфекции. Основные признаки гепатита: желтушность кожных покровов, лихорадка, тошнота, утомляемость, в лабораторных анализах – нарушения функции печени и специфические антигены вируса гепатита В. Острое заболевание может быстро приводить к летальному исходу, переходить в хроническую инфекцию или заканчиваться полным выздоровлением. Считается, что после перенесенного ВГВ формируется стойкий иммунитет. Хронический вирусный гепатит В связан с развитием цирроза и рака печени.

Существуют специальные тесты для выявления либо текущих, либо перенесённых форм вирусного гепатита В. Для подтверждения диагностики производится анализ на антигены вируса, антитела к ним и ДНК вируса.

Полимеразная цепная реакция отличается высокой чувствительностью и специфичностью. Методом ПЦР можно определить ДНК вируса качественно или количественно. Благодаря качественному методу подтверждается присутствие вируса гепатита В в организме и его активное размножение. Количественное определение вирусной нагрузки позволяет оценить интенсивность развития болезни, эффективность проводимой терапии или развитие устойчивости к противовирусным препаратам.

Имеется связь между уровнем вируса в крови и исходом острого вирусного гепатита В. Низкая виремия почти не даёт шансов на переход инфекции в хроническую фазу, а носитель не опасен для окружающих. При высокой вирусной нагрузке (≥ 5 копий/мл) риск хронизации заболевания увеличивается, и пациент становится потенциальным источником инфекции. Подтверждена взаимосвязь количества ДНК вируса в крови, наличия HBeAg, увеличенной АЛТ и развитием цирроза печени или гепатоцеллюлярной карциномы.

Эффективность противовирусной терапии оценивается по уменьшению количества ДНК вируса в крови. Через 3-6 месяцев после начала лечения вирусная нагрузка при адекватном терапевтическом ответе должна уменьшиться на 1-2 порядка. Отсутствие уменьшения количества вируса или его увеличение на фоне проводимого лечения требует пересмотра и изменения терапии.

Количественное определение ДНК вируса гепатита В в сочетании с клинической картиной, биохимическими показателями, маркерами инфекции, а также результатами биопсии печени позволяет составить прогноз заболевания и определить необходимость противовирусной терапии.

Для чего используется исследование?

• Для предсказания протекания вирусного гепатита В.
• Для подтверждения хронической формы вирусного гепатита В.
• Для определения носителей вирусного гепатита В и контроля активности размножения вируса.
• Для выявления скрытых и мутантных версий вируса гепатита В.
• Для оценки эффективности противовирусного лечения и разработки дальнейших шагов терапии.

Когда проводится исследование?

• При качественном определении ДНК вируса гепатита В.
• При острых и хронических формах вирусного гепатита В.
• При смешанных гепатитах.
• Перед началом и в процессе противовирусной терапии.

Что означают результаты?

• «Не обнаружено» – ДНК вируса гепатита В не выявлена или её содержание ниже чувствительности анализа (200 копий/мл = 90 МЕ/мл).
• 10^5 копий/мл (2*10^4 МЕ/мл) – высокая вирусная нагрузка, активное инфицирование (необходимо заменить противовирусную терапию).
• > 1,0*10^8 копий/мл (>4,8*10^7 МЕ/мл) – ДНК вируса гепатита В зафиксирована в концентрации, превышающей линейный диапазон.

Линейный диапазон концентраций ДНК вируса гепатита В, определяемых детектирующим амплификатором, составляет 7,5*10^2 – 1,0*10^8 копий/мл (3.6*10^2 – 4,8*10^7 МЕ/мл).

Что может влиять на результат?

Важные замечания

• Количественный анализ ДНК вируса гепатита В является обязательным перед началом противовирусной терапии. В процессе лечения тест необходимо повторять каждые 3-6 месяцев.
• Вирусный гепатит В часто бывает с сопутствующим вирусным гепатитом D.

Кто назначает исследование?

Чан Генри Лик-Юэн, Уонг Мэй Линг и другие. Применение количественной оценки ДНК вируса гепатита B для предсказания реверсии антигена HBe в случаях хронического гепатита B. J Clin Microbiol. Октябрь 2003; 41(10): 4793–4795. PMCID: PMC294957

• Принципы внутренней медицины Хэррисона. 16-е изд. Нью-Йорк: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
• Управление гепатитом B. Конференция согласования NIH. Программа и аннотации. 20–22 октября 2008 года.

Нормы и интерпретация результатов

Качественный анализ показывает наличие вируса в крови, и вот его результаты:

• «Обнаружено» свидетельствует о том, что в биоматериале найдён фрагмент ДНК, свойственный вирусу гепатита;
• «Не обнаружено» — это обычный показатель для анализа у здорового человека.

С помощью количественного анализа ПЦР выявляется уровень концентрации вируса в крови, параметры измеряются в цифрах.

Нормальные пределы исследования составляют от 400 тысяч МЕ/мл до 800 тысяч МЕ/мл. В заключении анализа могут быть указаны следующие результаты:

• «Ниже диапазона измерения» — вирус присутствует в незначительном количестве;
• «Не обнаружено» — тест не выявил вирус в образце;
• «Выше диапазона измерения» — высокая вирусная нагрузка.

Количественный анализ важен для оценки успешности и сроков проведения противовирусного лечения.

Генотипирование выполняется для определения клинически значимых генотипов HCV (гепатита С). Результаты этой процедуры помогают оценить прогноз заболевания и предсказать продолжительность лечения.

Несмотря на успехи медицины, распространение болезней, связанных с поражением печени, остается очень высоким. В этой ситуации особое значение имеет современная лабораторная диагностика вирусных гепатитов, понимание патогенеза заболевания, форм течения болезни и стадий иммунного ответа.

Оценка результатов исследования

Результаты тестирования представлены в виде качественных показателей – положительных или отрицательных. Отрицательный результат указывает на отсутствие антител к HBeAg в сыворотке. Положительный результат – это обнаружение антител к HBeAg, что может указывать на раннюю стадию острого вирусного гепатита B, остром инфекционном процессе, начальном этапе выздоровления или длительном хроническом гепатите B.

Критериями наличия хронического гепатита В являются:

Обнаружение вируса гепатита В методом ПЦР (качественно)

Нормой считается отсутствие вируса гепатита B в крови. Качественная диагностика его методом ПЦР позволяет подтвердить его наличие у пациента и, таким образом, установить причину заболевания.

Данное исследование дает полезную информацию для диагностики острого вирусного гепатита В в инкубационном и раннем периоде развития заболевания, когда основные серологические маркеры в крови у пациента могут отсутствовать. Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Аналитическая чувствительность метода ПЦР составляет не менее 80 вирусных частиц в 5 мкл, прошедшей выявление ДНК пробы, специфичность – 98%.

Этот метод имеет решающее значение для диагностики и отслеживания хронического ВГВ. Примерно 5-10% случаев цирроза и других хронических болезней печени вызваны постоянным носительством вируса гепатита B. Маркерами активности данных болезней являются HBeAg и ДНК вируса гепатита B в крови.

Метод ПЦР позволяет определять в крови ДНК вируса гепатита В как качественно, так и количественно. Определяемым фрагментом в обоих случаях служит уникальная последовательность ДНК гена структурного белка вируса гепатита В.

Обнаружение ДНК вируса гепатита B в пробах с использованием ПЦР необходимо для:

Исчезновение ДНК вируса гепатита В из крови – признак эффективности терапии

Вирус гепатита В (HBV), определение ДНК методом ПЦР в крови (количественное исследование — вирусная нагрузка)

Гепатит B (ВГВ, HВV) является острым инфекционным заболеванием, вызванным ДНК-содержащим вирусом HBV, который преимущественно передается парентерально. Клинические случаи характеризуются симптомами острого поражения печени и интоксикацией (как с желтухой, так и без неё) и имеют разнообразные клинические проявления, от полного выздоровления до возможного перехода в хронический гепатит B, цирроз печени и гепатоцеллюлярную карциному. Вирус гепатита B содержит ДНК и устойчив к воздействию внешней среды (включая УФ-излучение, изменения температуры и химические вещества).

Гепатит В является антропонозом. Источниками инфекции при гепатите B являются больные с различными формами данного заболевания. Вирус у инфицированных лиц содержится в крови, сперме, вагинальном секрете. Механизм инфицирования – гемоконтактный (парентеральный).

Способы передачи инфекции включают естественные (сексуальные, бытовые, перинатальные) и искусственные, связанные с парентеральными вмешательствациями. Всеобъемлющая восприимчивость к ВГВ связана с наличием специфических рецепторов к HBs антигену на гепатоцитах.

Ведущее эпидемиологическое значение при парентеральных гепатитах имеют искусственные пути передачи возбудителя, которые реализуются при проведении немедицинских и медицинских манипуляций, сопровождающихся повреждением кожи или слизистых оболочек, а также манипуляций, связанных с риском их повреждения.

Передача вирусов гепатита B при немедицинских манипуляциях, сопровождающихся повреждением кожи или слизистых, происходит через инъекции наркотических препаратов (риск составляет 80-100%), татуировки, пирсинг, ритуальные обряды, а также косметические процедуры, маникюр и педикюр с использованием загрязненных инструментов.

Группу повышенного риска составляют медицинские работники, пациенты, нуждающиеся в гемодиализе или переливаниях крови, заключенные, члены семей HBs-положительных лиц, новорожденные от HBs-положительных матерей.

В жизненном цикле вируса гепатита B существуют две основные фазы: репликация и интеграция.

В фазе репликации происходит воспроизведение (размножение) вируса. ДНК вируса проникает в ядро гепатоцита, где с помощью ДНК-полимеразы синтезируется нуклеокапсид, содержащий ДНК вируса, антигены HBcAg, HBeAg, которые являются основной мишенью иммунной системы.

После этого нуклеокапсид перемещается из ядра в цитоплазму, где осуществляется репликация белков вирусной оболочки (HBsAg), что приводит к образованию полноценного вириона. Избыток HBsAg, не использованный в процессе сборки, попадает в кровь через межклеточное пространство. Завершение полной сборки вируса сопровождается презентацией растворимого нуклеокапсидного антигена – HBeAg на поверхности гепатоцита, где он распознается иммунными клетками. Антиген HBcAg находится внутри печеночной клетки и не определяется серологическими методами, так как отсутствует в свободном состоянии в крови. Вместо этого в крови обнаруживаются антитела (anti-HBc), вырабатываемые в ответ на его высокую иммуногенность.

В фазе интеграции происходит интегрирование (встраивание) фрагмента вируса гепатита В, несущего ген HBsAg, в геном (ДНК) гепатоцита с последующим образованием преимущественно HBsAg. При этом репликация вируса прекращается, однако генетический аппарат гепатоцита продолжает синтезировать HBsAg в большом количестве.

Вирусная ДНК может интегрироваться не только в гепатоциты, но и в клетки поджелудочной железы, слюнных желез, лейкоциты, сперматозоиды, и клетки почек. Этап интеграции приводит к клинико-морфологической ремиссии. На этом этапе часто формируется состояние иммунологической толерантности к вирусу, что приводит к снижению активности заболевания и носительству HBsAg. Интеграция делает вирус недоступным для иммунного контроля.

Длительность инкубационного периода составляет от 1-4 до 6 месяцев, в среднем – 80 дней. Гепатит В протекает циклически, с различной степенью тяжести: легкая, средняя и тяжелая.

Преджелтушный период продолжается от 8 до более чем 12 дней. Заболевание начинается постепенно. Характерны симптомы астеновегетативного (слабость, утомляемость, разбитость) и диспепсического (потеря аппетита, тошнота, иногда рвота, горечь во рту, тяжесть и ноющие боли в правом подреберье) характера. Часто возникают головные боли и нарушения сна.

Примерно у 20-30% больных наблюдают боли в крупных суставах, уртикарную сыпь, реже кожный зуд. В конце преджелтушного периода увеличивается печень (иногда селезенка), появляются темная моча и ахоличный кал. При лабораторном обследовании в моче обнаруживают уробилиноген, иногда желчные пигменты. В крови повышается активность АЛТ и АСТ, обнаруживается ДНК вируса и специфические маркёры HBV-инфекции (HBsAg, HBeAg, анти-HBcIgM). Преджелтушный период может отсутствовать, тогда потемнение мочи и желтушность склер служат первыми симптомами болезни.

Желтушный период. При появлении желтухи общее самочувствие пациентов ухудшается: усиливается слабость, аппетит снижается вплоть до анорексии, появляются тошнота, сухость и горечь во рту, часто – головные боли и головокружения, а артралгии прекращаются. На этом этапе печень ещё больше увеличивается. Постепенно усиливается желтуха, достигая максимума на 2-3 неделе.

Моча становится тёмной, кал на высоте желтухи становится ахоличным. Продолжительность желтушного периода варьирует от нескольких дней до нескольких недель, чаще составляет 2-6 недель. Повышение активности АЛТ в 30-50 раз регистрируют в течение всего желтушного периода. Белково-синтетическая функция печени при ВГВ нарушается при тяжёлом течении болезни

(снижение уровня альбумина, протромбинового индекса). В периферической крови наблюдается тенденция к лейкопении и лимфоцитозу, СОЭ может оставаться в норме или снижаться.

Возможны субклиническая и инаппарантная формы (отсутствие жалоб и клинических проявлений, но выявление специфических маркеров гепатита В при повышенном уровне или нормальном уровне АЛТ).

Подтверждение диагноза гепатита B основывается на выявлении специфических серологических маркеров и ДНК вируса. Рекомендуется проводить определение ДНК вируса гепатита B методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) как качественно, так и количественно у пациентов с подозрением на острый вирусный гепатит B для ранней диагностики и определения уровня вирусной нагрузки.

ПЦР позволяет выявить ДНК вируса в сыворотке крови, лимфоцитах, что указывает на репликацию. ДНК ВГВ начинает обнаруживаться в крови в среднем через месяц после инфицирования и является первым диагностическим маркером ВГВ, опережая появление HBsAg на 10-20 дней. Исследование на ДНК ВГВ позволяет проводить раннюю диагностику ОГВ, выявлять скрытые (латентные) формы ГВ и мутантные по HBeAg штаммы вируса. Количественное определение ДНК ВГВ позволяет судить о вирусологическом ответе при лечении.

Положительный результат ПЦР после 6 месяцев указывает на хроническую инфекцию. Измерение вирусной нагрузки (количество ДНК вируса в крови) помогает оценить вероятность перехода заболевания в хроническую форму. Высокие уровни печеночных трансаминаз при положительном результате ПЦР являются показателями необходимости начала лечения. В ходе терапии вирусного гепатита B исчезновение ДНК вируса демонстрирует эффективность проводимого лечения.

Показания к назначению:

• диагностика острого гепатита B;
• выявление скрытых, безсимптомных форм гепатита B;
• диагностика гепатитов смешанной этиологии – определение основного вируса;
• определение стадии активной репликации вируса при хроническом гепатите B;
• мониторинг эффективности терапии.

Референсные значения: не обнаружено (отрицательный результат). Рекомендуется воздерживаться от еды в течение 2-3 часов перед анализом.

Отрицательный результат: ДНК вируса гепатита В не выявлена или значение ниже предела чувствительности метода.