Микробиологическое исследование ликвора является важным методом диагностики инфекционных заболеваний центральной нервной системы, таких как менингит и энцефалит. Это исследование позволяет выявить патогенные микроорганизмы, их тип и чувствительность к антибиотикам, что существенно влияет на выбор адекватного лечения.
Для получения достоверных результатов важно правильно собрать ликвор, осуществляя процедуру в стерильных условиях и минимизируя риск контаминации. Также следует учитывать временные рамки доставки образцов в лабораторию, так как задержка может привести к изменению микробной флоры и затруднить диагностику.
- Цель исследования: Определение наличия инфекционных агентов в ликворе для диагностики менингита и других заболеваний центральной нервной системы.
- Типы микробиологических анализов: Бактериологические, вирусологические, микологические и параклинические исследования.
- Методы забора материала: Ликвор обычно получают путем люмбальной пункции, что требует соблюдения стерильности.
- Интерпретация результатов: Анализ включает оценку множества факторов, таких как количество клеток, наличие микробов, их тип и чувствительность к антибиотикам.
- Значение для клиники: Раннее обнаружение инфекций позволяет начать своевременное лечение и уменьшить риск серьезных осложнений.
Исследование спинномозговой жидкости на наличие микробной инфекции выполняется при симптомах, схожих с менингитом, а В случаях комы и неясных неврологических нарушений.
Спинномозговая жидкость обычно стерильна, и положительные результаты анализа всегда являются важным индикатором. Менингиты могут вызываться разнообразными микроорганизмами. Наиболее часто выявляются следующие патогены:
1) при гнойных менингитах: менингококк, пневмококк, стафилококк золотистый, стрептококки групп А, В, D, Н, бактерии коли, протеус, псевдомонос и др.;
2) при асептическом менингите: палочка туберкулеза, возбудители лептоспироза и токсоплазмоза, различные вирусы.
Все манипуляции должны проводиться с соблюдением асептики. Забор жидкости осуществляется в две стерильные пробирки: одну отправляют на цитологический анализ, другую — на бактериологическое исследование. Учитывая чувствительность некоторых патогенов к холоду, образец необходимо как можно быстрее доставить в лабораторию при температуре около 37 °C.
Пробу центрифугируют, затем верхнюю жидкость с помощью стерильной пипетки переносят в другую пробирку для биохимического и серологического анализа. Оставшийся осадок вместе с около 0,5 мл жидкости используется для приготовлений для посева. Из осадка подготавливаются два тонких мазка на предметные стекла, которые окрашиваются метиленовым синим по методу Грама и затем сразу же исследуются под микроскопом. Иногда типичные морфологические признаки позволяют выявить только определённые патогены, такие как менингококк или пневмококк.
Результаты первичной микроскопии служат основой для предварительного диагноза. Для посева берется жидкость из стеклянной пробирки.
Посев спинномозговой жидкости производят на следующие питательные среды:
Микробиологическое исследование ликвора является важной частью диагностики заболеваний центральной нервной системы. При сборе ликвора необходимо соблюдать строгие условия стерильности, поскольку даже незначительное загрязнение может повлиять на результаты. Я всегда подчеркиваю важность правильной техники взятия проб и их транспортировки в лабораторию. От этого зависит не только диагностика, но и эффективность последующего лечения пациента.
В ходе микробиологического исследования ликвора анализируются как бактериальные, так и вирусные агенты. Практика показывает, что методы, такие как культуральные и молекулярные исследования, позволяют выявить патогены с высокой точностью. Я предпочитаю использовать полимеразную цепную реакцию (ПЦР) для выявления вирусов, так как этот метод обеспечивает быструю и надежную диагностику. Не менее важно проводить антибиограмму для определения чувствительности выявленных бактерий к антибиотикам, что дает возможность корректировать терапию по мере необходимости.
Также необходимо учитывать, что микробиологическое исследование ликвора не ограничивается только выявлением патогенов. Важно проводить качественный анализ клеточного состава и количественных показателей, таких как уровень белка и глюкозы. Эти параметры могут дать дополнительную информацию о степени воспаления и характере заболевания. При интерпретации результатов я всегда учитываю как клинические проявления, так и другие лабораторные данные, что позволяет создать полное представление о состоянии пациента и выработать наиболее эффективную стратегию лечения.
1) «двойная среда»;
2) «среда для контроля стерильности»;
3) жидкую среду Сабуро;
4) среда Рапопорта.
В осадок пробирки добавляют 5 мл сывороточного полужидкого кляра, чтобы обогатить среду.
Проверку роста проводят после ночной инкубации, а в дальнейшем ежедневно в течение 7 дней до появления роста.
При отсутствии роста микробов результат считается отрицательным к 9-10 дню.
Выделение микроорганизмов из спинномозговой жидкости указывает на их этиологическую значимость, и необходимо провести количественную оценку бактериального роста.
В случае положительного результата следует выполнить дальнейшую идентификацию микроорганизмов, определив их свойства, тип и чувствительность к антибиотикам.
Бактериология: посев спинномозговой жидкости
Спинномозговая жидкость или ликвор — это жидкость, которая непосредственно контактирует с центральной нервной системой, то есть головным и спинным мозгом.Ликвор вырабатывается в сосудистых сплетениях желудочков головного мозга и обеспечивает постоянство внутренней среды, путем транспорта биологически активных веществ, выведении продуктов метаболизма нервных клеток, регулирует внутричерепное давление и защищает от механических воздействий. У здорового человека ликвор стерилен, он может содержать глюкозу, белок и некоторые химические элементы.
Обнаружение микрофлоры в ликворе свидетельствует о серьезных заболеваниях, требующих быстрого вмешательства, чтобы избежать таких тяжелых неврологических нарушений, как парезы и параличи.
Запоздалое лечение может привести к фатальным последствиям, что ставит перед врачами задачу быстрого подбора эффективной терапии. Для максимально быстрого восстановления состояния пациента необходимо использовать только те антибиотики, которые действуют на выявленные патогенные бактерии; именно поэтому и проводится посев спинномозговой жидкости.
Забор ликвора производят в хирургическом манипуляционном кабинете. Пациент должен лежать на боку с приведенными к животу ногами. Поверхность кожи обрабатывают дезинфицирующим раствором. Затем проводят инфильтрационную анестезию, с целью предотвращения болевого синдрома.
Пункция выполняется иглой Бира с мандреном между остистыми отростками третьего и четвертого поясничных позвонков, определяемыми по условной линии между подвздошными костями. Иглу вводят на глубину около 5-7 см, до попадания в позвоночный канал, откуда производится забор ликвора. Первые капли ликвора сливаются, так как они могут содержать эритроциты из сосудов мягких тканей. Затем ликвор собирается в стерильную емкость.
После процедуры пациенту рекомендуется лежать в горизонтальном положении минимум два часа. Ликвор передается в лабораторию, где подготавливается необходимое количество пробирок для анализа по каждому из антибиотиков.
Лаборант производит инокуляцию, разводя стандартную микробную взвесь в питательной среде и добавляя ее в каждую пробирку, после чего вводится исследуемый антибиотик. Пробирки помещаются в термостат на 24 часа.
Подготовка к люмбальной пункции
Люмбальная пункция проводится натощак, и за 4 часа до забора спинномозговой жидкости нельзя употреблять пищу или напитки.
После пункции в течение нескольких часов пациент должен находится под наблюдением врачей. При отсутствии осложнений в течение 2-3 дней нужно соблюдать постельный режим.
Методика проведения анализа
Чтобы получить образец спинномозговой жидкости, пункция осуществляется в субарахноидальном пространстве, при этом ткани нервной системы не подвергаются повреждениям. Прокол осуществляется ниже второго поясничного позвонка под местной анестезией, и для анализа требуется всего лишь 2-3 мл ликвора. Собранный пунктат центрифугируется, осадок помещается на предметное стекло и высушивается в термостате.
Затем мазки окрашиваются разными методами и изучаются под микроскопом.
Процедура проходит практически безболезненно, неприятные ощущения возникают только при введении иглы. Осложнения после пункции отмечаются достаточно редко. Как правило, они связаны с неправильной техникой проведения процедуры.
Как проводится процедура?
Пациенту рекомендуется лечь на бок, согнуть голову и прижать колени к животу, чтобы принять эмбриональную позу. В некоторых случаях пункция выполняется в сидячем положении, что также требует наклона вперед. Сгибание спины необходимо для увеличения расстояния между соседними позвонками в поясничной области, что уменьшает расстояние от кожи до спинномозгового канала.
Перед пункцией выполняют местную анестезию. Прокол выполняю внизу спины в пространство между спинальными отростками 5 или 4 поясничных позвонков. В процессе введения иглы вы можете почувствовать небольшой дискомфорт, но болевых ощущений обычно не возникает из-за местной анестезии. После попадания иглы в спинномозговой канал из просвета иглы начинает отходить ликвор.
Обычно забор составляет 3-5 мл жидкости. Вся процедура занимает около 10 минут. В течение одного-двух дней после пункции могут возникнуть неприятные ощущения в месте инъекции. Однако дискомфорт чаще всего связан с действием анестетиков, а не с самой процедурой. Пункцию предпочитают выполнять в первой половине дня, чтобы успеть направить образец ликвора в лабораторию.
Несмотря на то что игла проникает в область, где находится спинной мозг, риск его повреждения при стандартной процедуре забора жидкости у взрослых минимален, так как у младенцев спинной мозг занимает весь канал.
Рост позвоночника существенно обгоняет рост спинного мозга, поэтому последний как бы «приподнимается вверх», и его нижняя граница оказывается на уровне 1 поясничного позвонка. Оставшееся пространство представляет собой мешок, заполненный жидкостью, в котором находятся корешки спинномозговых нервов, направляющиеся вниз к «своим» отверстиям в позвоночнике. Повредить иглой корешок также сложно, как проткнуть иголкой вермишель в бульоне. Травма межпозвонкового диска исключена, так как игла вводится с противоположной стороны позвонка.
Какие побочные эффекты можно ожидать после пункции?
Наиболее распространённым (примерно у 20% пациентов) побочным эффектом люмбальной пункции является головная боль. Снижение давления ликвора может вызывать раздражение оболочек мозга, полных болевых рецепторов. Перепад давления выражен при переходе в вертикальное положение. Поэтому сразу после пункции рекомендуется полежать 2 часа.
В течение последующих 2-3 дней следует избегать физической активности и, по возможности, несколько раз в день на 30 минут ложиться в горизонтальное положение. Головная боль проявляется при вертикальном положении и исчезает в горизонтальном. Обычные препараты для обезболивания часто неэффективны при головной боли после пункции, а лучший способ — это лежать.
Общий объем СМЖ взрослого человека составляет от 140 до 270 мл. Ежесуточно вырабатывается 600—700 миллилитров жидкости, то есть ликвор полностью обновляется примерно 4 раза в день. В процессе люмбальной пункции извлекается обычно 3-5 мл жидкости. Таким образом, извлекаемый объем СМЖ довольно незначителен в сравнении с общим объемом ее циркуляции.
Предпочтительно использовать как можно более тонкую иглу для люмбальной пункции, чтобы избежать просачивания ликвора через прокол. Для быстрого восполнения объёма ликвора, следует ускорить его продукцию. Рекомендуется пить достаточное количество жидкости (не менее 2 литров минеральной воды в день) и кофе (по 2-3 чашки ежедневно).
Стоимость процедуры
Цены на спинальную пункцию зависят от уровня клиники, сложности и характера процедуры.
В Москве стоимость проведения люмбальной пункции варьируется в зависимости от медицинского учреждения:
- Клиника «Эл. Эн.» — 5400 рублей.
- «ПЕНТА-КЛИНИК» — 3350 рублей.
- Медицинский центр «КБ МГМУ имени Сеченова» — 2300 рублей.
- ЦКБ №2 ОАО «РЖД» — 1700 рублей.
- Клиническая больница №119 – 1500 рублей.
- ДКБ имени Семашко – 1450 рублей.
Чем выше квалификация медиков и качество оборудования учреждения, тем больше может составлять стоимость процедуры.
Отзывы
Практически все пациенты отзываются о люмбальной пункции положительно. Процедура не вызывает выраженного дискомфорта или боли, однако провоцирует психическое напряжение. В большинстве случаев осложнения после поясничного прокола отсутствуют, хотя здесь все зависит от уровня квалификации врача.
Ирина, 45 лет: «Несколько раз мне проводили лечение в стационаре по поводу менингита, тогда же назначали и люмбальную пункцию. Вначале было страшно, но потом я поняла, что ничего страшного в этом нет. Небольшое неприятное ощущение было лишь во время укола анестетика, а потом лишь ощущение вмешательства в пояснице, хотя она онемела. Самое главное — найти опытного специалиста, чтобы избежать возможных последствий.»
Екатерина, 34 года: «Мне делали люмбальную пункцию дважды из-за подозрения на менингит. После процедуры серьезных осложнений не возникло, но после первой пункции у меня была головная боль. Во второй раз я попросила врача использовать меньшую иглу, и не ощутила ничего, а головная боль отсутствовала.»
Игорь, 44 года: «Мне пришлось делать спинномозговую пункцию 3 раза. Во время процедуры боль не ощущается, слышно было только движение в области поясницы, это вызывает психологический дискомфорт. Я попытался отвлечься и перестал на это обращать внимание. Осложнений после исследования ни разу не было».
